美蓝浓度高和染色时间过长都会增加酵母菌的死亡,美兰有氧化性,浓度太高会使活菌很快致死,浓度低老龄细胞与活细胞不易区分;染色时间短,活细胞还没从蓝变无色,观察到的活细胞数量会比预计的少,染色时间长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液,活细胞数量减少。
美蓝是一种无毒性染料,它的氧化型是蓝色的,而还原型是无色的,用它来对酵母的活细胞进行染色,由于细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型,所以酵母的活细胞无色,而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此,用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态,还可以区分死、活细胞。但美蓝的浓度、作用时间等均有影响,应加注意。影响:会造成更多的死细胞,在显微镜下观察,活的是透明无色,衰老的是淡蓝色,死亡的是蓝色,如果美蓝染色液作用时间过长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液,影响实验结果。